翻訳 5’ → 3’ の方向 リボソーム上で行われる リボソームは蛋白質とrRNAの複合体 遺伝情報=アミノ酸配列

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1 翻訳 5’ → 3’ の方向 リボソーム上で行われる リボソームは蛋白質とrRNAの複合体 遺伝情報=アミノ酸配列
塩基３つで１個のアミノ酸に対応している →コドン　43= 64 とおり→遺伝暗号表 5’-A-U-G-G-C-U-G-G-C-U-U-A-A-C-G-C-G-U- 3’mRNA　 Met Ala Gly Leu Thr Arg 50アミノ酸の蛋白質 →50×3=150塩基対のDNAにコードされている ５版 p.516 ４版 p.521

2 遺伝コード表（Genetic Code） AUG（Met） →開始コドン 翻訳開始の目印 UAA, UAG, UGA →終止コドン
　翻訳開始の目印 UAA, UAG, UGA →終止コドン 　翻訳終了の目印 5’-A-U-G-G-C-U-G-G-C-U-U-A-A-C-G-U-A-A- 3’mRNA　 Met Ala Gly Leu Thr stop ５版 p.517 ４版 p.524

3 コドンとアンチコドン tRNAが，コドンと相補的な配列（アンチコドン）を介してコドンに結合し，コドンに対応したアミノ酸を結合する
５版 p.518 ４版 p.525

4 タンパク質合成 リボソーム mRNA コドン ５版 p.519 ４版 p.526

5 タンパク質合成 tRNAに結合したアミノ酸は、リボゾーム上で先に合成されたポリペプチド鎖のアミノ基と 反 応 してペプチド結合を形成する
この反応は rRNAが触媒すると考えられている ５版 p.519 ４版 p.526

6 5’CUU-AUG-GCU-UGG-CCC-UAA 3’ Leu-Met-Ala-Trp-Pro-stop
問題16・15 ５版 p.519 ４版 p.525（問題16・16） 5’CUU-AUG-GCU-UGG-CCC-UAA 3’ Leu-Met-Ala-Trp-Pro-stop マクマリー p. 525 No.42 (H12) イ M F Q Y AUG UUU CAG UAC UCA ・・・ 4番目のUが欠失→フレームシフト M F S T AUG UUC AGU ACU CA ・・・ ウ 置換 GAA→UAA Glu stop 欠失 GUA A→UAA Val stop 置換，欠失のどちらの場合 でも生じうる（挿入の場合も） 正解は１番

7 制限酵素 制限酵素(restriction enzyme)は、 DNAの特定の塩基配列（4～8塩基対が多い）を認識して切断する酵素である。400種以上知られており、そのうち、約100種が市販されている。制限酵素は、ウイルスなどの外来遺伝子を切断して防御すると考えられている。自身のＤＮＡは、同じ配列を認識するメチル化酵素によりメチル化して切断されないようにしている（制限修飾系）。　 制限酵素の認識配列と切断箇所 ・ ６塩基認識 　　EcoRI　5’G|AATT|C3’ 　　　　　　3’C|TTAA|G5’ 　　PstI　 5’C|TGCA|G3’ 　　　　　　　　　3’G|ACGT|C5’ 　　BamHI　5’G|GATC|C3’ 　　　　　　　　　3’C|CTAG|G5’ 　　　　　　　　　 （粘着末端） ・ ４塩基認識 　　HaeIII 5’GG|CC3’ 　　3’CG|GG5’ 　　AluI 5’AG|CT3’ 　　3’TC|GA5’ 　　　　　　　　（平滑末端） ５版 p.520 ４版 p.527

8 DNAの配列決定法 5′---------TTGAAGCAGC--- DNAポリメラーゼ dATP,dGTP,dCTP,dTTP
3′ AACTTCGTCG--- プライマー 5′ T DNAポリメラーゼ dATP,dGTP,dCTP,dTTP ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP 3′ AACTTCGTCG--- T G A A G C A G C 5′ T T ←ddTTP 伸長停止 5′ T T ←dTTP ←ddGTP G 伸長停止 5′ TTG A 5′ TTGAA 5′ TTGAAG 5′ TTGAAGC 5′ TTGAAGCA 5′ TTGAAGCAG 5′ TTGAAGCAGC これらの断片をキャピラリーゲル電気泳動により分離し，レーザー光を照射して各断片の蛍光を検出することにより配列を知ることができる ５版 p.520

9 ＤＮＡシーケンサー

10 PCR (Polymerase Chain Reaction)
2nd cycle forward primer 5′ 3′ template reverse primer dATP,dGTP,dCTP,dTTP DNA polymerase 変性（95℃） 二本鎖は解離して一本鎖となる 3rd cycle アニーリング（55℃） templateとprimerが二本鎖を形成 伸長反応（72℃） primerから相補鎖を合成 20-30 cycles 2n-n-1 nth cycle ５版 p.521 ４版 p.530