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「生命科学特別講義Ⅱ 」 1.地衣類概説Ⅰ (9/4 ①) 2.地衣類概説Ⅱ (9/4 ②) 3.地衣類の進化と系統 (9/4 ③)

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1 「生命科学特別講義Ⅱ 」 1.地衣類概説Ⅰ (9/4 ①) 2.地衣類概説Ⅱ (9/4 ②) 3.地衣類の進化と系統 (9/4 ③)
4.地衣類の一次代謝 (9/4 ④) 5.地衣類の環境耐性 (9/4 ⑤) 6.地衣類の二次代謝 (9/5 ①) 7.地衣成分の生物活性 (9/5 ②) 8. 地衣類観察会 (9/5 ③-⑤) : 羅漢の里) 9 .地衣類の培養と地衣成分生産 (9/6 ①) 10.地衣類の形態形成と人工栽培 (9/6 ②) 11.地衣類の利用 (9/6 ③) 12.地衣類グループ討論 (9/6 ④) 13.地衣類グループ発表 (9/6 ⑤) 2018/9/18

2 地衣成分の生物活性 地衣成分の生物活性 中間テスト 地衣類観察会について 抗細菌増殖抑制 抗真菌増殖抑制 チロシナーゼ阻害 ETC
2018/9/18

3 天然地衣類の民間薬的利用 地衣生薬 地衣類 生物活性 和漢 依蘭苔 Cetraria islandica 健胃
  地衣生薬   地衣類 生物活性 和漢 依蘭苔 Cetraria islandica 健胃 松蘿 Usnea spp. 抗菌、利尿、強心、鎮咳、月経不順 地茶 Thamnolia spp. 降圧、鎮静、鎮痛、解熱 石耳 Umbilicaria spp. 腹痛、消化不良、回虫症 石芯 Cladonia spp. 健胃、止血、降圧、目疾 Lethariella spp. 鎮静、消炎、精神分裂、神経衰弱 肺衣 Lobaria spp. 消化不良、腎炎、回虫症 皮果衣 Dermatocarpon spp. 降圧、消化不良 マラヤ Kaju Angin Usnea spp. 鎮咳 欧州 Isla-Moss Cetraria islandica 健胃、風邪、咽喉 スーダン Sheiba Usnea molliuscula 健胃、鎮咳、鎮痛 南米 Protousnea spp. 皮膚改善 2018/9/18

4 地衣類を利用した民間薬 咽喉薬(タブレット) 咽喉薬(飲料) 2018/9/18

5 地衣類を利用した飲料・食料 飲料(雪茶) 食料(岩茸) 2018/9/18

6 地衣成分の薬理活性 生物活性 地衣成分 報告年 Monoamine oxidase 阻害 Norsolorinic acid 1991
  生物活性  地衣成分 報告年 Monoamine oxidase 阻害 Norsolorinic acid Trypsin 阻害 Atranorin Tyrosinase 阻害 Resorcinol deriv Prostagrandin 合成阻害 Metadepsides 学習促進 Polysaccharides 鎮痛 Diffractaic and usnic acids 1995 抗コレステロール合成 Gyrophoric acid deriv 抗酸化 Pannarin 殺線虫 Orsellinic acid deriv 昆虫成育阻害 Atranorin and vulpinic acid 1979 植物生育阻害 Depsides 抗 HIV GE-3S (Polysaccharides) 1989 抗 HSV-1 Hypericin deriv 抗 Epstein-Barr Virus Usnic and lichesterinic acids 1995 2018/9/18

7 秋田県立大学地衣類バンク (世界の子嚢菌 約50000種類) (世界の地衣類 約14000種類) 凍結天然物 種類 約 2000
(世界の子嚢菌 約50000種類) (世界の地衣類 約14000種類) 凍結天然物 種類 約 2000    培養物 種類 地衣菌数 約 450    共生藻数 約 50 2018/9/18

8 地衣類の生物活性スクリーニング 薬理活性 総件数(培養・天然) ヒット件数 条件 チロシナーゼ阻害 37 1 2 (>50%)
薬理活性 総件数(培養・天然) ヒット件数 条件 チロシナーゼ阻害 (>50%) ラジカル補足 (>50%) キサンチンオキシダーゼ阻害 (>50%) モノアミンオキシダーゼ阻害 (>50%) EB ウィルス活性化抑制 (RI>2) 細菌増殖抑制 (>15mm) 真菌増殖抑制 (>15mm) 血管内皮細胞増殖抑制 (>80%) メラノーマ増殖抑制 (>80%) 2018/9/18

9 地衣抽出物の抗細菌活性 2018/9/18

10 地衣由来抗菌物質 2018/9/18

11 地衣抽出物の抗植物病原性真菌活性 2018/9/18

12 メラニン生合成 2018/9/18

13 地衣抽出物のチロシナーゼ阻害活性 2018/9/18

14 発癌二段階説 2018/9/18

15 発癌プロモーション抑制活性測定法 2018/9/18

16 発癌プロモーション抑制活性 2018/9/18

17 発癌プロモーション抑制活性物質 2018/9/18

18 SOD様活性測定原理 2018/9/18

19 地衣抽出物のSOD様活性 2018/9/18

20 地衣成分の光化学系Ⅱ阻害活性 2018/9/18

21 動物細胞増殖制御活性測定法 2018/9/18

22 地衣抽出物の動物細胞増殖制御活性 (コントロール100) 2018/9/18

23 生物活性試験方法 *木材腐朽菌 Trametes versicolor, FFPRI 1030 (カワラタケ,CV)
Fomitopsis palustris, FFPRI 0507 (オオウズラタケ,TP) *地衣菌材料 地衣菌数: 46種類 植付量: 5mm角塊x2個/シャーレ *培地条件 培地: 麦芽酵母エキス(MY)培地 グルコースペプトン(GP)培地 ポテトデキストロース(PD)培地 培地量: 15ml/90mmシャーレ *培養材料 培養温度: 20℃ 培養期間: 前培養1ヶ月、本培養10日間 光条件: 暗所 *評価 増殖阻止: 阻止円の大きさの程度 +:明瞭、±:不明瞭、-:効果なし 2018/9/18

24 実験材料(試験菌) カワラタケ(CV) タコウキン科カワラタケ属 Trametes versicolor (L.:Fr.) Pilat
 タコウキン科カワラタケ属  Trametes versicolor (L.:Fr.) Pilat     (=Coriolus versicolor (L. ex Fr.)  Quel.), FFPRI 1030 ・白色腐朽菌 ・広葉樹林・針葉樹林に生息 オオウズラタケ(TP)  タコウキン科ツガサルノコシカ   ケ属  Fomitopsis palustris (Berk.et Curt.)  Gilbn & Ryv. (=Tyromyces   palustris (Berk.et Curt.) Murr.),  FFPRI 0507 ・褐色腐朽菌 ・木材腐朽の世界標準菌 ヤマケイポケットガイド⑮「きのこ」引用 2018/9/18

25 地衣菌の抗木材腐朽菌増殖阻害活性 2018/9/18

26 地衣菌の抗木材腐朽菌増殖阻害活性 2018/9/18

27 地衣菌の抗木材腐朽菌増殖阻害活性 2018/9/18

28 培養・抽出方法 と スクリーニング 培 地 菌 体 抗 酸 化 チロシナーゼ 反応阻害率(%) 吸光度測定 DPPH ラジカル捕捉活性試験
  培養・抽出方法 と スクリーニング 地衣類ライブラリ 液体培養 培地と菌体に分離 培 地 菌 体 凍結乾燥 酢酸エチル抽出 メタノール抽出 留去・秤量・分取 留去・秤量・分取 サンプル 1mg/ml サンプル 1mg/ml 抗 酸 化 チロシナーゼ 反応阻害率(%) 吸光度測定 DPPH ラジカル捕捉活性試験 2018/9/18

29 スクリーニング測定方法 抗酸化 チロシナーゼ エタノール溶液(3:5=水:エタノール) 80μl DOPA-リン酸溶液 140μl
  スクリーニング測定方法 抗酸化 チロシナーゼ サンプル溶液(100%メタノール) 20μl エタノール溶液(3:5=水:エタノール) 80μl 1min 撹拌 DPPH溶液 100μl 50%エタノール 100μl 30min インキュベート(室温) 吸光度測定(517nm) サンプル溶液(10%メタノール) 20μl DOPA-リン酸溶液 140μl 1min 撹拌 チロシナーゼ溶液 40μl 蒸留水 100μl 3min インキュベート(37℃) 吸光度測定(471nm) 2018/9/18

30 スクリーニングサンプル 番号 培養地衣 番号 培養地衣 1 Cladonia bellidiflora
  スクリーニングサンプル 番号 培養地衣 番号 培養地衣 1  Cladonia bellidiflora   2   Phaeographis asteriformis 3   Niebla josecuervoi 4  Arthonia cinnabarina 5    Ramalina crassa 6    Xanthoria mandschurica 7   Trypetheliopsis boninensis 8   Tremolecia atrata 9   Niebla homalea 10  Cladonia nigripes 11  Haematomma puniceum 12  Pertusaria mourogana 13  Ocelluraria 14  Cladonia vulcani 15  Graphis awaensis 16  Thelotrema subtile  17  Calicium japonicum 18  Lecanora cenesia 19  Usnea rubescens 20  Phaeophyscia endococcina 21  Parmotrema tinctorum  22  Umbilicaria decussata  23  Evernia prunastri  24  Acarospora fuscata  25  Arthonia spadicea 26  Anaptychia pandurata 27  Platismatia interrupta 28  Stereocaulon japonicum 29  Caloplaca flavorubescens 30  Niebla fimbriata 31  Cladonia graciliformis 2018/9/18

31   抗酸化活性(DPPH)データ 2018/9/18

32   抗酸化活性(DPPH)   - 培地と菌体 - 抗酸化活性 -培地- 抗酸化活性 -菌体- 2018/9/18

33   チロシナーゼ阻害活性データ 2018/9/18

34   チロシナーゼ阻害活性   - 培地と菌体 - チロシナーゼ阻害活性 -培地- チロシナーゼ阻害活性 -菌体- 2018/9/18

35 中間テストについて 小テスト勝ち抜き個人戦 最終30名限定(観察会参加資格) 特典 観察会参加後、優 確定 2018/9/18

36 地衣類観察会について 場所 羅漢の里周辺 時間 午後1時半~4時半 集合場所 八柱神社 集合時間 午後1時半 2018/9/18

37 地衣類観察会について 神姫バス 県立大理学部前 13:13 発 瓜生東 13:24 着
神姫バス 県立大理学部前 13:13 発 瓜生東 13:24 着 瓜生東 16:50 発 県立大理学部前 17:02 着 2018/9/18


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