MRSA感染を伴う難治性慢性中耳・外耳炎治療のための 新規院内製剤の開発とその製剤学的・薬理学的評価 1 MRSA感染を伴う難治性慢性中耳・外耳炎治療のための 新規院内製剤の開発とその製剤学的・薬理学的評価 技術センター医学部等部門　　　　　　　　 総合薬学科　技術班　　湯元　良子 目的 　慢性中耳炎の起炎菌として、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)の占める割合が増え、除菌できない難治性中耳炎の症例が増加している。19世紀後半にBurowにより考案されたブロー氏液(酢酸アルミニウム溶液)は、近年、慢性化膿性中耳炎患者から単離した各種起炎菌への良好な抗菌作用が報告されたことを契機に、我が国においても有用性が再評価されるようになってきた。しかしながらブロー氏液に関する情報は少なく、またその製剤学的な性質についても不明な点が多い。　 　本研究では、ブロー氏液の品質に関する製剤学的評価および抗菌活性の評価を行うとともに、長期保存(5ヶ月)の影響について検討を行った。またブロー氏液は調製に4-5日を要するため、市販の酢酸アルミニウムを用い、新たな迅速調製法の開発を行った。

2 1 実験方法 ブロー氏液の調製： BP‘88に準拠したブロー氏液の処方を、日本のいくつかの病院で用いられている調製法(手稲渓仁会病院　院内製剤マニュアル）に従い、調製した。 品質評価: アルミニウム濃度、pH、浸透圧 長期保存後の品質評価: ガラス製バイアル瓶に入れ、冷所(4℃）にて5ヶ月間保存し、上記の品質評価を行った。 抗菌活性評価: S. aureus FDA 209および広島大学病院にて検出された臨床分離株のMRSA 3株を試験菌とし、カップ法により測定した。 迅速調製法の検討: 市販の酢酸アルミニウム (Al2O(CH3CO2)4 または Al(OH)(CH3CO2)2) を酢酸および酒石酸溶液に溶解し調製した。 　　　　 迅速調製液についても品質評価および抗菌活性評価を行った。

ブロー氏液の調製 1) 33 （調製に要する日数: 5日以上） 225 g 250 mL 45 g 100 g 750 mL 硫酸ｱﾙﾐﾆｳﾑの溶解 ブロー氏液の調製 1) 225 g 250 mL 45 g 100 g 750 mL 硫酸アルミニウム（無水物） 酢酸 （33%） 酒石酸 炭酸カルシウム 精製水 1) Kashiwamura et al., Otology & Neurotology, 25: 9-13, 2004. 1) 硫酸アルミニウム225gを滅菌済みガーゼで二重に包み、滅菌精製水650mL 中に懸垂し24時間静置して溶解した。その後ろ過し、ろ液を滅菌精製水で650mL とした。 ろ過前後の溶液  2) 乳鉢内で炭酸カルシウム100gに滅菌精製水100mL を加え研和し、その中に溶解した硫酸アルミニウムを少量ずつ加え、さらに酢酸を加えた。 3) 1日3-5回攪拌しながら3日間冷所に放置した。 4)上澄み液をろ過し、ろ液に酒石酸を加え、さらにろ過して調製した。 炭酸カルシウムとの反応 （調製に要する日数:　5日以上）

S.aureus FDA 209 および MRSA に対する 4 4 S.aureus FDA 209 および MRSA に対する 各種溶液の抗菌活性の比較 10 15 20 25 30 35 阻止円の直径 （mm） MRSA ×5 ×10 ×20 酢酸 酢酸・酒石酸 ブロー氏液 S.aureus FDA 209 希釈倍率 10 20 30 X 5 X 20 X10 阻止円の直径 （mm） 殺菌作用 ブロー氏液 酢酸・酒石酸 酢酸 殺菌作用 静菌作用

ブロー氏液の品質に及ぼす長期保存の影響 5 液量回収率（%） pH 浸透圧比 アルミニウム濃度（w/v%） 73.2 ± 4.0 平均 ± 標準誤差 （n=3） 液量回収率（%） pH 浸透圧比 アルミニウム濃度（w/v%） 73.2 ± 4.0 2.8 ± 0.1 4.4 ± 0.1 3.1 ± 0.1 － 2.7 ± 0.1 4.5 ± 0.1 3.2 ± 0.1 調製直後 5ヵ月後 ブロー氏液は冷所(4℃)に5ヶ月間保存した。 浸透圧比 = ブロー氏液の浸透圧／生理食塩水の浸透圧

MRSAに対するブロー氏液の抗菌活性に及ぼす保存期間の影響 (4℃) 6 阻止円の直径 （mm） 保存期間 （月） 10 15 20 1 5 MRSA # 1 # 2 # 3 MRSAに対するブロー氏液の抗菌活性に及ぼす保存期間の影響 (4℃) 殺菌作用

ブロー氏液の臨床使用症例 7 (広島大学病院耳鼻咽喉科外来) a b (すべてMRSAが検出された症例) 治療経過日数(日） 10 20 症例 1. 71歳女性、放射線治療後の右滲出性中耳炎 治療経過日数(日） 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 鼓室内注入（1回/2週） 点耳（2回/日、28日間） 症例 １． 71歳、女性 耳漏再発 耳漏停止 穿孔閉鎖 a 耳漏停止 鼓室内注入 点耳（2回/日） a: 平成15年4月14日 ブロー氏液使用前、耳漏確認 （6日間） （16日間） 症例 2． 37歳、男性 耳漏再発 穿孔閉鎖 鼓室内注入（1回/1週） 耳漏停止 点耳（1回/日、14日間） 症例 3． b 4歳、女性 耳漏停止 b: 平成15年7月7日　 耳漏停止、治癒(乾燥認める） (すべてMRSAが検出された症例)

酢酸アルミニウム溶液 (1.7% アルミニウム含有) の迅速調製法 8 酢酸アルミニウム溶液 (1.7% アルミニウム含有) の迅速調製法 酢酸アルミニウム 1) 121 or 103 g 酢酸 (33%) 250 mL 酒石酸 　 45 g 精製水　　 適量 合計 1 L ポイント ・酒石酸 ・加熱 ・pH 1) Al2O(CH3CO2)4: 121 g Al(OH)(CH3CO2)2: 103 g 酢酸アルミニウム、酢酸、酒石酸を秤量し精製水に懸濁 ↓ 沸騰湯浴中で加温溶解 (約2時間で完全溶解) 精製水で全量1000ｍLとした 調製方法

抗菌活性に及ぼすブロー氏液および迅速調製液のアルミニウム濃度の影響 S. aureus FD209P アルミニウム濃度 (w/v%) 阻止円の直径 （mm） 10 15 20 25 30 1 0.1 0.3 0.03 0.5 MRSA # 1 MRSA # 2 抗菌活性に及ぼすブロー氏液および迅速調製液のアルミニウム濃度の影響 ブロー氏液 迅速調製 ( Al2O(CH3CO2)4) 迅速調製 (Al(OH)(CH3CO2)2) 9

MRSAに対する酢酸アルミニウム溶液の抗菌活性に及ぼす保存の影響(4℃) 10 MRSAに対する酢酸アルミニウム溶液の抗菌活性に及ぼす保存の影響(4℃) MRSA #1 #2 #3 殺菌作用 10 12 14 16 阻止円の直径 （mm） 1 4 保存期間（月） 迅速調製した酢酸アルミニウム溶液(Al2O(CH3CO2)4) は精製水で10倍希釈し、抗菌活性を測定した。

まとめ 11 ブロー氏液 迅速調製酢酸アルミニウム溶液 1　ブロー氏液の抗菌活性はアルミニウム濃度に比例し増大した。また、同一のアルミニウム濃度においてS.aureus およびMRSAに対する抗菌活性は同じであった。 2 長期保存（4℃、5ヶ月)後もブロー氏液の物理化学的性質や抗菌活性に変化は認められなかった。 迅速調製酢酸アルミニウム溶液 3　 Al2O(CH3CO2)4 または Al(OH)(CH3CO2)2を用いることにより、酢酸アルミニウム溶液(1.7％アルミニウム含有)が2時間で調製可能となった。 4　迅速調製した酢酸アルミニウム溶液はS.aureus および MRSAに対し、同一のアルミニウム濃度において、ブロー氏液と同程度の抗菌活性を示した。 5　長期保存(4℃、4ヶ月)後も迅速調製した酢酸アルミニウム溶液の物理化学的性質および抗菌活性に変化は認められなかった。

12 結論 　市販の酢酸アルミニウムを用いることにより酢酸アルミニウム溶液（1.7％アルミニウム含有）が2時間で調製可能となった。迅速調製した酢酸アルミニウム溶液は S. aureus およびMRSAに対してブロー氏液と同程度の抗菌活性を示した。 　以上、新規酢酸アルミニウム溶液は、院内で短時間かつ簡便に調製が可能であり、MRSA感染性の難治性中耳炎の治療に有用である可能性が示唆された。 　今後、診療科と共同で、本製剤の臨床的有効性について解析を進める計画である。